Polysciences pei 40000是一種聚乙烯亞胺,分子量為40000,用于轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。它具有高效、低毒和低成本等優(yōu)點(diǎn),適用于各種細(xì)胞系和培養(yǎng)方式。本文將介紹Polysciences PEI 40000如何配制。
一、Polysciences pei 40000的特性
特性一:Polysciences pei 40000是一種有機(jī)大分子,具有高陽(yáng)離子電荷密度。它的聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能起到有效的“質(zhì)子海綿"作用。這種特性使得Polysciences pei 40000能夠與DNA形成穩(wěn)定的復(fù)合物,并在細(xì)胞內(nèi)釋放出DNA,從而提高轉(zhuǎn)染效率。
特性二:與分子量為25000的線性聚乙烯亞胺相比,Polysciences pei 40000具有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性。
特性三:Polysciences pei 40000是一種白色或淺黃色的固體,溶于熱水和低pH值的冷水,不溶于常見(jiàn)的有機(jī)溶劑,如乙醇、丙酮等。
二、Polysciences pei 40000的溶液配制方法
Polysciences pei 40000溶液的配制方法簡(jiǎn)單、適用且有效,可以制備出濃度為1mg/mL的轉(zhuǎn)染試劑溶液。具體步驟如下:
步驟一:將1g Polysciences pei 40000放入盛有900mL水的玻璃燒杯中,加入攪拌轉(zhuǎn)子,放置于磁力攪拌器上,形成一個(gè)較小的漩渦。
步驟二:加熱至60-80°C,加入12M鹽酸滴定至pH小于2.0,蓋上燒杯,繼續(xù)攪拌3小時(shí),直至粉末溶解。
步驟三:冷卻至室溫,加入10M氫氧化NA滴定至pH為6.9-7.1,移液到玻璃量筒,加水補(bǔ)足至1L。
步驟四:用0.1-0.2µm PES真空無(wú)菌過(guò)濾器過(guò)濾消毒,分裝至無(wú)菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶中,-20°C保存。
注意:加熱或加酸有助于Polysciences pei 40000的溶解,但不一定需要降低pH到那么低,可以根據(jù)實(shí)際情況適量調(diào)節(jié)。冷凍部分溶液可在-20°C保存長(zhǎng)達(dá)一年,部分解凍的溶液可在4°C保存兩周,不可反復(fù)凍融。未開(kāi)封的粉末有效期兩年,可在室溫下保存直至使用。
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