Alzet滲透泵的基本操作指南

　　一、Alzet滲透泵型號選擇

　　Alzet滲透泵提供了100ul、200ul和2ml三種不同的藥物容量規(guī)格，持續(xù)時間從3天到6周不等。實驗時應根據(jù)具體需求選擇合適的型號。其中，100ul和200ul的適合成年小鼠使用，而2ml的由于容積較大，更適合大鼠或其他體型較大的動物。

　　二、Alzet滲透泵濃度計算

　　藥物濃度的調(diào)配需根據(jù)每日用藥量和緩釋泵的輸送速率兩項參數(shù)來計算，每日用藥量可通過查閱專業(yè)文獻獲取。此外，每支緩釋泵的輸送速率信息會附在包裝盒上，應根據(jù)包裝上的速率進行配藥。

　　濃度計算舉例：

　　Eg：2001滲透泵，給藥：抗利尿激素(ADH)，

　　1.查閱文獻發(fā)現(xiàn)，大鼠正常的ADH分泌量為30ng/天/只，或1.25ng/小時/只。然后，計算出完成1.25ng/小時所需輸注量所需的ADH濃度：

　　ko=Q•Cd

　　其中ko(µg/hr)是質(zhì)量輸送速率，Cd(µg/µl)表示藥物溶液濃度，Q(µl/hr)表示泵的泵送速率。

　　2.2001型泵的(標稱)泵送速率為1µl/hr(Q)，因此所需濃度(Cd)為：

　　Cd=1.25 ng/hr/1µl/hr=1.25 ng/µl

　　=1.25 x 10-3µg/µl

　　3.2001型泵儲液體積(標稱)為200µl。為了達到所需的1.25 x 10-3µg/µl濃度，應在200µl中溶解的ADH量為：

　　m=c•v

　　(1.25 x 10-3µg/µl)x 200µl=0.25µg

　　綜上，為了模擬大鼠正常的ADH分泌量30 ng/天/只（或1.25 ng/小時/只），必須在溶液中配制濃度為1.25 x 10-3µg/µl的ADH溶液。應配制過量溶液，以保證泵填充期間的安全裕度。

　　注意事項：

　　1、不能根據(jù)Alzet滲透泵自身體積來計算配藥濃度，Alzet滲透泵實際載藥體積會稍大于宣稱體積；

　　2、泵體埋入動物體內(nèi)后應在釋放周期結(jié)束時取出，不能一直留在動物體內(nèi)。

　　三、Alzet滲透泵藥液灌充

　　1、將Alzet滲透泵垂直握在手中，從頂部的孔處插入充液針，直至針尖輕輕接觸到緩慢釋放泵底部，然后略微向上提起充液針約1mm。

　　2、輕柔地推動注射器，將藥液注入緩慢釋放泵（緩慢釋放泵應始終保持垂直）。當在緩慢釋放泵的孔處看到藥液溢出時，請停止注射，輕輕拔出充液針。

　　3、將流量調(diào)節(jié)器完q插入泵體，完成注射，隨后進行培育或植入手術(shù)。

　　4、若泵體內(nèi)出現(xiàn)氣泡，可將流量調(diào)節(jié)器拔出并重新進行注射。

　　注意事項：

　　1、泵內(nèi)藥物液體需充盈，泵內(nèi)不應有空氣存在，否則可能導致泵送速度不穩(wěn)定。

　　2、灌輸速度宜適中，以免產(chǎn)生氣泡，避免采用容積過大的注射器進行填充。

　　四、Alzet滲透泵泵體孵育

　　在Alzet滲透泵啟動階段，可能會出現(xiàn)泵送速率不穩(wěn)定的情況。為了調(diào)節(jié)泵送速率，建議在植入前進行預處理。

　　1、準備50ml離心管，倒入適量的0.9%生理鹽水。

　　2、將已灌裝藥液的Alzet滲透泵放入離心管中，然后將離心管放入37℃恒溫箱中進行一定時間的培養(yǎng)（具體時間根據(jù)不同型號的Alzet滲透泵而異）。

　　注意：在培養(yǎng)過程中，確保生理鹽水完q覆蓋泵體。

　　五、Alzet滲透泵植入手術(shù)

　　Alzet滲透泵可在背部皮下或腹腔植入進行全身性給藥；此外也可連接導管將藥物引導到特定部位進行給藥。

　　六、Alzet滲透泵皮下植入

　　1、使動物陷入麻醉狀態(tài)，令其躺臥。

　　2、在肩胛骨之間的皮層上開啟一個裂口。

　　3、利用止血夾分離皮下結(jié)締組織，形成一處間隙。

　　4、將漸進泵植入其中，確保流量調(diào)節(jié)器不朝向切口。

　　5、利用傷口鉗或縫合線縫合皮層切口。

　　七、Alzet滲透泵腹腔植入

　　1、麻醉動物，使動物處于仰臥姿態(tài)。

　　2、在動物的胸廓下腹中線的皮膚上用刀劃開口。

　　3、鑷子挑起腹肌，避免傷及內(nèi)臟，然后用剪刀向下剪開腹肌。

　　4、將緩釋泵植入切口，流量調(diào)節(jié)器不能朝向切口。

　　5、用縫線縫合肌肉切口，皮膚切口可以使用傷口夾或縫線縫合。

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