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探秘DMEM培養(yǎng)基配方的精妙平衡

 更新時間:2023-12-15 點擊量:982

Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)培養(yǎng)基作為細胞培養(yǎng)領域的重要組成部分,其配方的設計直接關系到細胞在體外環(huán)境中的生長和繁衍。本文將剖析DMEM培養(yǎng)基的配方,逐一解讀其中每一成分的作用,為科研人員提供詳實的培養(yǎng)基配方指南。

DMEM培養(yǎng)基配方成分詳解:

★基礎培養(yǎng)基:

DMEM(Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基)是一種廣泛使用的基礎培養(yǎng)基,可用于支持多種不同的哺乳動物細胞生長。原始的DMEM培養(yǎng)基配方中葡萄糖濃度為(1 g/L),DMEM高糖培養(yǎng)基包含4500 mg/L的D-葡萄糖,其提供了培養(yǎng)基的基礎結構,是營養(yǎng)的主要來源。

★緩沖劑:

碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)(3.7 g/L),其使得DMEM高糖培養(yǎng)基能夠5–10% CO2的環(huán)境來維持生理pH值。

Hepes緩沖液:調節(jié)培養(yǎng)基的pH值,確保適宜的酸堿平衡。

★氨基酸和維生素:

L-谷氨酰胺是細胞生長的必須氨基酸,為培養(yǎng)的細胞提供重要的能量來源,能促進細胞生長,有助于細胞存活;

L-胱胺酸(Cystine)為蛋白質和氨基酸代謝提供基礎。

L-蛋氨酸是轉甲基化和轉硫的前體。

維生素B群、維生素C和維生素E可滿足細胞對維生素的需求。

抗生素(通常為青霉素和鏈霉素)可預防微生物污染。

★生長因子(可選):

表皮生長因子(EGF)和胰島素樣生長因子(IGF):可根據需要添加,促進特定細胞類型的增殖。

如果需要,可以在DMEM中添加生長因子。但是添加的生長因子類型和數量應根據特定的細胞類型和實驗需求來確定。是否在DMEM中添加生長因子,以及添加哪種生長因子,取決于實驗的具體需求和實驗目標。

以上僅列出DMEM培養(yǎng)基部分配方成分,對不同細胞培養(yǎng),可以根據細胞特性自行調整DMEM培養(yǎng)基配方。通過深入理解DMEM培養(yǎng)基的配方,科研人員可以更好地根據實驗需求進行調整,為細胞提供精準、有針對性的培養(yǎng)環(huán)境。中科百抗的DMEM培養(yǎng)基包含4.5 g/L葡萄糖、酚紅、L-谷氨酰胺和110 mg/L丙酮酸銨,以磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)作為緩沖液,不含有蛋白質、脂質或生長因子的配方,因此在使用時需要額外補充10%的胎牛血清(FBS),以確保細胞得到充足的營養(yǎng)和生長所需的支持。


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